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影响电泳分离效果的因素有哪些?

人气:844 发表时间:2024-08-15

 影响电泳分离效果的因素主要涵盖以下几方面:

 1.电场强度:电场强度加大,带电粒子迁移速度越快,但过高的电场强度可能引发发热、产生对流等状况,对分离效果造成不良影响。例如,在强电场中,小分子物质可能迁移过快,导致分离不够清晰。

 2.缓冲液的pH值:它会影响粒子的带电特性和电荷量。不同的蛋白质等分子在不同pH 值下带电状态不同。比如,某些蛋白质在特定pH值时带电量增加,迁移速度改变,可能无法与其他物质全部分离。

 3.缓冲液的离子强度:离子强度低,电泳速度快,但缓冲能力不佳;离子强度高,电泳速度慢,不过缓冲能力良好。若离子强度不合适,可能使得电流不稳定,从而影响分离。

 4.温度:温度升高,分子运动加快,迁移速度提高,但也可能使缓冲液黏度降低,影响缓冲效果。例如,高温也许使样品变性,影响分离的准确性。

 5.支持介质:像滤纸、凝胶等的孔径大小和均匀程度等都会影响分子的迁移与分离效果。孔径过小可能阻碍大分子的迁移,孔径过大则分离效果差强不佳。

 6.样品的性质:包含样品的浓度、分子大小、形状以及电荷分布等。浓度过高可能导致条带重叠,分子形状不规则同样会影响迁移速度。 


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